二手熒光分光光度計(jì) 是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。
(1)熒光分析的主要特點(diǎn)是靈敏度高、選擇性好,熒光分析的靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個(gè)數(shù)量級(jí)。分光光度法通常在 10-7 級(jí),而熒光的靈敏度達(dá)10-9。
(2)強(qiáng)選擇性強(qiáng),熒光物質(zhì)具有兩種特征光譜:激發(fā)光譜和吸收光譜,相對(duì)于分光光度法單一的吸收光譜來說,熒光光譜可根據(jù)激發(fā)光譜和發(fā)射光譜來鑒定物質(zhì)。
(3)信息量豐富,能提供熒光物質(zhì)的多種參數(shù)。
(4)但是熒光分析方法也有其不足之處:①很多物質(zhì)本身不發(fā)熒光;②熒光的產(chǎn)生與化合物結(jié)構(gòu)的關(guān)系不明確;③干擾因素多,光分解、氧淬滅、易污染。
(1)在生物領(lǐng)域的應(yīng)用
該領(lǐng)域主要用于臨床測定生物樣品中某些成分的含量,生物技術(shù)及免疫技術(shù)的分析等,如脫氧核糖和脫氧核糖核酸的含量測定、DNA、抗體、抗原等各方面的研究。在此領(lǐng)域中主要時(shí)利用各種熒光探針進(jìn)行分析檢測,主要分為生物納米熒光探針和生物非納米熒光探針。
其中納米技術(shù)的興起,打開了熒光分析的又一個(gè)新的領(lǐng)域。由于納米材料具有很好的熒光性,寬激發(fā),窄發(fā)射等優(yōu)良的光譜特點(diǎn),使其成為熒光分析中的重要的研究對(duì)象,引起了研究者的興趣。
(2)在食品領(lǐng)域的應(yīng)用
該領(lǐng)域主要用于食品中礦物質(zhì)及金屬元素、氨基酸、維生素、菌類污染、添加劑、防腐劑、食品包裝有害物質(zhì)、農(nóng)藥殘留等的分析檢測。特別是與HPLC、TLC、FIA等技術(shù)的結(jié)合可以更好的達(dá)到食品中各種物質(zhì)的檢測效果。
目前我國食品標(biāo)準(zhǔn)日趨化,對(duì)于食品分析的要求也越來越趨向于靈敏和微量化。熒光分析正可以滿足這方面的分析要求。
(3)在藥物分析中的應(yīng)用
藥物分析領(lǐng)域可以利用熒光分析進(jìn)行藥物的有效成分鑒定、藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究、臨床藥理藥效分析等。藥物熒光分析可以分為三類:直接熒光分析、間接熒光分析和納米熒光分析。常規(guī)熒光分析法很早被應(yīng)用于分析抗瘧疾藥物奎寧,隨著熒光分析法的發(fā)展,其應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,目前被廣泛用于抗菌素藥物、止痛藥、鎮(zhèn)靜劑、止血藥等的分析。
(4)在環(huán)境分析中的應(yīng)用
該領(lǐng)域主要利用熒光分析檢測環(huán)境中的物質(zhì)的含量,主要是對(duì)水體、礦石和土壤進(jìn)行檢測。隨著有機(jī)化工、石油化工、醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展, 以及農(nóng)藥( 殺蟲劑、除草劑等) 的大量使用, 有機(jī)化合物對(duì)環(huán)境的危害和污染日益嚴(yán)重。
目前被列入有機(jī)污染物監(jiān)測國家標(biāo)準(zhǔn)方法中的熒光分析法有;冷原子熒光法對(duì)有機(jī)汞的測定;乙酰化濾紙層析熒光分光光度法對(duì)大氣飄塵和水體中苯并( a) 芘的測定;酚類 、木質(zhì)磺酸酯、多環(huán)芳烴( 芘、螢、蒽) [ PASH]的熒光分析法測定等。
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